长(zhǎng)时间的仿生栽培和生态研(yán)究,使得羊肚(dù)菌的发生(shēng)规(guī)律和(hé)生理需(xū)求(qiú)逐渐为人们所掌握。一些羊肚菌爱(ài)好(hǎo)者和科技工作者开始意识(shí)到菌(jun1)种(zhǒng)在羊肚菌驯化(huà)栽培(péi)中的重要性。这是从(cóng)仿生栽(zāi)培向人工栽培的重要转变。
菌种(zhǒng)的驯化(huà)选育、补料(liào)技(jì)术和人为刺激(jī)诱发出菇(gū)是羊肚菌人工栽培区(qū)别于仿生栽培的(de)重要标(biāo)志。
实际上,20世纪80年代,美国(guó)科学家Ower就模拟自然(rán)环境在实验(yàn)室内成功实现了(le)羊肚(dù)菌(jun1)出(chū)菇[33~36],随后(hòu)由其合作者Mills进行了相对成功的工厂化(huà)栽培应用(yòng)[4]。
无论是民间还(hái)是官方资料都显示,我国的羊(yáng)肚(dù)菌人工(gōng)栽培技(jì)术都明显晚于Ower的技术专利。
蔡知桂(guì)等在2010年公布了一种羊肚菌(jun1)栽培技术专利[37],技术(shù)流程依次为栽培(péi)种的制作、培养(yǎng)料的(de)制备、播种、发菌管理及出菇管(guǎn)理等。值得注意的(de)是,该专利要求在菌(jun1)丝成熟之前至少进(jìn)行(háng)一次营养液(yè)补充(chōng),这可以认为是羊(yáng)肚菌仿生栽培向纯人工栽培的过渡。赵琪等公布了一种(zhǒng)梯棱羊(yáng)肚菌栽培(péi)方(fāng)案和菌种(zhǒng)制作方案的专利技术,首次提及所用的菌种是经过分子鉴定的梯棱羊肚菌(M.importuna)[38,39]。
2.1 菌种的选择
羊(yáng)肚菌子囊果具(jù)有明(míng)显的形态可塑性(xìng),因此其物种的鉴定(dìng)一(yī)直是一个难题。早期(qī)对
羊肚菌菌(jun1)种的选(xuǎn)择和确定大多根据(jù)形态(tài)特(tè)征,保留下来的(de)模式(shì)标本和数据资料有(yǒu)限,因此,很难推定早期资料中的所用品种和现代(dài)分类系统的对应关系。近年(nián)来,应用(yòng)分子系(xì)统发育(yù)学鉴定羊肚菌(jun1)物种(zhǒng)得到广泛(fàn)的认可[40~43]。王波和鲜灵对四川大邑县、崇州市、郫县(xiàn)和涪城(chéng)区的人工(gōng)栽培品种进(jìn)行形态特征的详(xiáng)细(xì)描述和分子鉴定(dìng),结果发现,所有(yǒu)羊肚(dù)菌品种(zhǒng)的ITS-DNA序列与数据库(kù)中(zhōng)梯棱羊肚菌相似度达100%,而与羊肚菌属的其他(tā)物(wù)种(zhǒng)相差甚远(yuǎn)[44]。赵琪等在(zài)公开的羊肚(dù)菌栽培专(zhuān)利中指出(chū),所用的品种(zhǒng)为(wéi)梯(tī)棱羊肚(dù)菌[38,39]。
自2012年起,我们在全(quán)国各地进行(háng)羊肚菌的(de)驯化(huà)栽培和标(biāo)本采(cǎi)集(jí)整理(lǐ)工(gōng)作(zuò),随(suí)后对(duì)来源清晰的4个(gè)商业推广菌株羊(yáng)肚(dù)菌1号、3号、6号和7号(hào)进行(háng)了(le)详细的形态特征(zhēng)记(jì)录和DNA序列分子鉴定分析。结果表明,羊肚(dù)菌1号和3号(hào)是梯棱羊(yáng)肚菌,6号为六妹羊肚菌(M.
sextelata),7号为(wéi)七(qī)妹羊肚菌(jun1)(M.septimelata),均属(shǔ)于黑色羊肚菌支(zhī)系[43]。其他品种是否可(kě)用(yòng)于驯化栽培有待进行(háng)深入研究,建议生产者在开展(zhǎn)羊肚菌人工栽(zāi)培(péi)时,应定向采(cǎi)集当(dāng)前已经应用的品(pǐn)种,经初(chū)筛、小试和中试后,再进行大(dà)面积的示范性栽培和推广。
2.2 补料技(jì)术
在有目的有意识驯化菌种的基础上,“外(wài)源营养袋”的出现和广(guǎng)泛使用促进了(le)羊肚(dù)菌产(chǎn)业的健康发展,外源(yuán)营养袋技(jì)术(shù)是羊(yáng)肚菌生产(chǎn)环节(jiē)中的最重(chóng)要技(jì)术处理(lǐ),是羊肚菌丰产(chǎn)的最重(chóng)要“能量”支撑。
Ower曾(céng)详细(xì)论述(shù)外(wài)源营养袋的技术原理和制作(zuò)工艺(yì),但(dàn)在随后的推(tuī)广应用中,并未被重(chóng)视和(hé)使用(注(zhù):Ower于1986年逝世,后期的推广由合作(zuò)者Mills进行)。Ower对其原理和适用方法的解释(shì)是羊肚菌需要在营养相对(duì)贫乏的环(huán)境中(zhōng)才能进行有性生殖,而其(qí)菌丝自(zì)身(shēn)储备的(de)能(néng)量(liàng)不足以(yǐ)支撑(chēng)其有性生殖过程,因此需要从外界吸收新的营养(yǎng)物质(zhì),同时需要在生产(chǎn)后期对新(xīn)的营养(yǎng)物质予(yǔ)以移(yí)除(chú),以使菌丝重新(xīn)回到营养贫乏状态转而(ér)进行(háng)有性生殖。Ower利(lì)用培养菌(jun1)核的培(péi)养(yǎng)料作为“外源性营养物”进行补料操作[34~36]。
我(wǒ)国谭方河先生最早(zǎo)使用外(wài)源(yuán)营养袋(dài)技术[4]。约2000年前后,出于“不同菌丝(sī)的配合”(不同“极性”的菌丝杂合)可能有助于出菇的认识,在菌丝萌发后,他采取在(zài)菌(jun1)床上(shàng)扣上接种有另一类型羊(yáng)肚(dù)菌(jun1)菌种的(de)菌袋(dài),以实现两种菌丝的融(róng)合,诱发出菇,此方法(fǎ)比不“杂交”具(jù)有明显的增产效果(guǒ),该(gāi)技术在早期曾被称(chēng)为“菌丝融合(hé)技术”。随后,谭方河先生又发现,只扣料袋(不(bú)接种)同样可以促进(jìn)增产,因此(cǐ)就推翻了“菌(jun1)丝融合的说法”,进而(ér)发展成为现今的外源(yuán)营养袋技术。
2.3 保(bǎo)育催菇
催菇是羊肚菌(jun1)栽培的重要环节,技(jì)术性较强,其目(mù)的(de)是创造不(bú)利于(yú)羊肚菌(jun1)继续营养生长的条件,使其转(zhuǎn)向生殖生长,其中包括营(yíng)养(yǎng)、水分(fèn)、湿度、温度(dù)、光线等(děng)刺(cì)激。
①营养刺激是指通(tōng)过移除营养实现营养(yǎng)刺激,该技术也是Ower专利(lì)中强调的环节,可行的操作是,外(wài)源营养袋施放后20~25天移除外源营养袋(dài)[34~36]。
②水(shuǐ)分刺激是自然界大型真菌出菇(gū)的重要(yào)条(tiáo)件。水(shuǐ)分(fèn)可冲刷(shuā)真菌分泌的(de)各种酶类物质,改变菌丝渗透压(yā),也是菌丝转(zhuǎn)向生殖生长(zhǎng)所(suǒ)需要湿润环境的重要保证。具体做法是:撤袋之后,大水浇灌,至(zhì)地面完(wán)全(quán)湿透[1]。
③湿度控制包(bāo)括土壤(rǎng)含水(shuǐ)量和空(kōng)气(qì)相对湿度,水分刺激(jī)使土壤含水量达到饱和,随后(hòu)控制土壤水分在20%~30%,原基发生前空气湿度在85%~95% [1]。
④目前没(méi)有(yǒu)数(shù)据直接支持温差刺激实现羊肚(dù)菌的生殖生长,但(dàn)大量数据表明,10 ℃左右的昼夜温差,有助于羊肚菌出菇(gū)。主要通过白(bái)天(tiān)闭棚增温,晚间掀(xiān)开棚(péng)通(tōng)风降温以加大温差[1]。
⑤栽培经验表明,光线也是影(yǐng)响出(chū)菇的一个重要指标(biāo),过强(qiáng)会(huì)抑制出菇,可行的操作是(shì)使(shǐ)用4~6针的遮阳网进(jìn)行遮阴处(chù)理。